Bakteriyalar o'sishini o'lchashning ko'plab usullari mavjud va bir usul boshqasidan ko'ra murakkabroqdir. Garchi ba'zida o'lchov izchilligini e'tiborsiz qoldirishga to'g'ri kelsa -da, bakteriyalar o'sishini aniq o'lchashning eng oson usuli etarli, shuning uchun u tez -tez ishlatiladi. Eng ko'p ishlatiladigan usullar - bakteriyalarni kuzatish va hisoblash, quruq yoki nam massani o'lchash va loyqalik/loyqalik darajasini o'lchash. Sizning maktabingiz laboratoriyasida ushbu tajribalardan kamida bittasini bajarish uchun zarur asbob -uskunalar bo'lishi kerak.
Qadam
3 -usul 1: Bakteriyalarni jonli ravishda kuzatish
Qadam 1. Ingredientlarni tayyorlang
Tayyorlanishi kerak bo'lgan va biologiya laboratoriyasida bo'lmasligi mumkin bo'lgan juda ko'p maxsus vositalar mavjud. Tajribani o'tkazishdan oldin barcha asbob -uskunalar va idishlarni tayyorlang, shunda hech qanday qiyinchilik bo'lmaydi. Siz darhol ishlatiladigan har bir ingredientni va ushbu tajribaning asosiy shartlarini bilishingiz kerak.
- Hisoblash kamerasini tayyorlang. Ichki kamerasi, mikroskop oynasi va mikroskopi bor, shuning uchun uni sozlash va ishlatish oson. Siz uni laboratoriya yoki maktab jihozlari do'konidan sotib olishingiz mumkin. Bu vositada butun jarayon davomida sizga ko'rsatma beradigan ko'rsatmalar bo'lishi kerak.
- To'kilgan idishni yoki yoyiladigan idishni tayyorlang. Bu ikkala konteyner ham ichidagi bakteriyalarni kuzatish imkonini beradi.
- Madaniyat - bu tajribada organizmlarning o'sishini tasvirlash uchun ishlatiladigan atama.
- Bulyon - bu madaniyat o'sadigan suyuq muhit.
Qadam 2. To'kilgan plastinka yoki plastinka usulidan foydalaning
Siz mikroskop yordamida ko'rish uchun bakteriyalarni to'g'ridan -to'g'ri idishga joylashtirishingiz mumkin. Kulturani likopchaga quying va mikroskop ostiga qo'ying. Mavjud bakterial hujayralar sonini kuzatib boring.
Qadam 3. Konsentratsiya dozasi to'g'ri ekanligiga ishonch hosil qiling
Agar juda ko'p bo'lsa, bakteriyalar bir -biriga to'planib qoladi va siz noto'g'ri hisoblashingiz mumkin. Ko'proq bulonni aralashtirib, madaniyatni suyultiring. Agar juda kam bo'lsa, hisoblash natijalari aniq bo'lmaydi. Filtrlash tizimi yordamida bulonni torting.
4 -qadam. Bakteriyalarni sanash
Oxirgi qadam - bakteriyalarni birma -bir sanash. Hisoblash kamerasidagi kattalashtiruvchi linzaga qarang va ko'rgan bakteriyalar sonini yozing. Boshqa testlar natijalari bilan solishtiring.
3 -usul 2: Quruq va nam massani o'lchash
Qadam 1. Agar to'g'ri uskunalar bor ishonch hosil qiling
Bu usulda qimmat uskunalar va ko'p vaqt sarflanadi. Agar laboratoriyangizda kerakli asbob -uskunalar bo'lmasa, boshqa usuldan foydalanish yaxshidir. Ammo, agar sizning laboratoriyangiz etarli darajada yaxshi jihozlangan bo'lsa, biz ushbu usulni tavsiya qilamiz, chunki u yanada izchil natijalar beradi. Ushbu usulda sizga kerak bo'ladi:
- Shlangi tortishish konveksiya pechi
- Alyuminiydan tayyorlangan tortish idishi
- Kolbalar to'plami (laboratoriya idishlari)
- Santrifüj mashinasi (santrifüj) yoki laboratoriya filtrlash tizimi
Qadam 2. Madaniyat kolbada ekanligiga ishonch hosil qiling
Qovoqqa madaniyat qo'shing. Bu bosqichda madaniyat bulon bo'lishi kerak, garchi keyinchalik u yana ajralib chiqadi.
Qadam 3. Alyuminiy tortish idishini laboratoriya pechida quriting
Buning o'rniga siz diametri 47 mm va teshik hajmi 0,45 mkm bo'lgan tsellyuloza asetat filtr membranasidan foydalanishingiz mumkin. Siz qanday tortish idishini ishlatmasligingizdan qat'iy nazar, uni torting, chunki uni keyinroq bakterial hujayralarni tortish paytida tortib olish kerak bo'ladi.
Qadam 4. Kulturani kolbaga bir hil aralashguncha aralashtiring
Hujayra tortishish kuchi tufayli tabiiy ravishda cho'kib ketadi va kolbaga bir tekis tarqalishi uchun uni aralashtirish kerak bo'ladi. Shunday qilib, siz ko'proq namuna olishingiz mumkin.
Bosqich 5. Bakterial hujayralarni bulondan ajratish uchun santrifugadan foydalaning
Bu asbob kolbani aylantiradi va tezlik bilan muvozanatlashadi, shunda u bulonni to'kib tashlaydi va kulturani kolbada qoldiradi.
Qadam 6. Qovoqdagi xamirni qirib tashlang va uni tortish idishiga soling
Bulyonni tashlang, chunki sizga endi kerak emas. Biroq, qovoqdan qutulmang, chunki u hali ham ishlatiladi.
Qadam 7. Santrifüj mashinasini yuving va chayish suvini idishga quying
Ho'l og'irlikni olish uchun yuvilgan suvni kolbadagi bakterial hujayralarga tushiring.
Qadam 8. Quruq vaznni toping
Quruq vaznni o'lchash uchun idishni o'choqqa qo'ying va ishlatilgan pech va/yoki tortish idishi ko'rsatmalariga muvofiq 6-24 soat davomida 100ºC haroratda quriting. Harorat juda yuqori emasligiga ishonch hosil qiling, shunda bakteriyalar yonmaydi. Tayyor bo'lgach, bakteriyalarni torting va natijani tortish idishi og'irligiga kamaytirishni unutmang.
3 -usul 3: loyqalikni o'lchash
Qadam 1. Kerakli asbob -uskunalarni tayyorlang
Sizga yorug'lik manbai va spektrofotometr kerak bo'ladi. Ikkalasini ham laboratoriya do'konlarida sotib olish mumkin. Spektrofotometrda sizda mavjud bo'lgan modelga muvofiq asbobdan foydalanish bo'yicha ko'rsatma bo'lishi kerak. Spektrofotometrning narxi ancha qulay va ulardan foydalanish oson, shuning uchun u bakteriyalar o'sishini o'lchashning eng keng tarqalgan usullaridan biriga aylanishi mumkin.
2 -qadam. Namunani yoqing
Layman terminiga ko'ra, loyqalik - namunaning loyqalik darajasi. Siz NTU (nefelometrik loyqalik birligi) da o'lchanadigan loyqalik o'lchov raqamini olishingiz kerak. Namunani aniq o'lchashdan oldin bu asbobni kalibrlash kerak.
3 -qadam. Natijalarni yozib oling
Bulaniqlikka namunadagi bakteriyalar soni ta'sir qiladi. Shuningdek, spektrofotometr sizga uzatilish foizini (%T) aytib beradi. Agar loyqalik kamaysa, bu ko'rsatkich oshadi. Bakteriyalar o'sishini o'lchash uchun natijalarni boshqa testlar bilan solishtiring.
Ogohlantirish
- Agar siz bakteriyalar koloniyasi bilan shug'ullanayotgan bo'lsangiz, xavfsizlik ko'zoynak va qo'lqop kabi xavfsizlik uskunalarini taqib ehtiyot bo'ling. Bundan tashqari, niqob taqish yaxshidir, ayniqsa, siz o'rganilayotgan bakteriyalar turini bilmasangiz.
- Har qanday bakteriyalarni, hatto zararsiz turlarini ham ishlatishdan oldin ehtiyot choralarini ko'ring. Ishni boshlashdan oldin tanangizdagi barcha ochiq yaralar to'liq yopilganligiga ishonch hosil qiling.
